由于各種轉(zhuǎn)基因方法的不同,轉(zhuǎn)基因的效率也不同,往往是僅有一部分細(xì)胞可以表達(dá)目的基因,沒(méi)有轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞將影響檢測(cè)的結(jié)果。如何將已經(jīng)轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞同未轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)進(jìn)行檢測(cè),是一個(gè)技術(shù)上的難點(diǎn)。
不銹鋼細(xì)胞篩網(wǎng)常用的一種方法就是將表達(dá)綠色熒光蛋白的質(zhì)粒和目的基因共轉(zhuǎn)染;在共轉(zhuǎn)染時(shí),加入目的基因表達(dá)質(zhì)粒的量遠(yuǎn)高于表達(dá)GFP質(zhì)粒的量,以保證表達(dá)GFP基因的細(xì)胞能夠表達(dá)目的基因。對(duì)醋酸纖維柱形濾器和三種聚醋無(wú)紡布濾器的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),白細(xì)胞的往除不僅依靠于過(guò)濾材料的性質(zhì),而且與血液的組成特別是血小板的存在密切相關(guān)。淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞總是被捕捉于
不銹鋼細(xì)胞篩網(wǎng)的小孔中,與濾器的外形、材料和血小板數(shù)目無(wú)關(guān),而粒細(xì)胞的分離卻依靠于粒細(xì)胞與血小板的相互作用及材料的性質(zhì)。