Zeocin™ 試劑是博來霉素抗生素家族的一個(gè)成員。 其抗性由編碼一種 13,665 道爾頓蛋白質(zhì)的 Shble 基因賦予。 在表達(dá)這種蛋白質(zhì)的細(xì)胞中,Zeocin™ 無法結(jié)合和切割細(xì)胞 DNA。 Zeocin™ 對大多數(shù)好氧細(xì)胞有效,可用于選擇哺乳動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞系、酵母以及細(xì)菌。 選擇細(xì)胞時(shí),Zeocin™ 的用量為50-2000 ug/ml(通常 300 ug/ml),具體取決于細(xì)胞類型。
博萊霉素zeocin的種類與等級說明
1、免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補(bǔ)體、抗原、免疫組織化學(xué)研究用試劑、細(xì)胞培養(yǎng)用試劑、細(xì)胞分離試劑、凝膠內(nèi)擴(kuò)散法及電泳試劑等。
2、基因工程用試劑包括基因表達(dá)與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、核酸制劑、內(nèi)切酶等。
3、誘變劑和致癌物質(zhì)主要供測定工作場所與生活環(huán)境中的毒物質(zhì)的致癌性與化學(xué)毒物的致突變性。
4、臨床診斷試劑主要供醫(yī)療系統(tǒng)中的臨床病理診斷、生化診斷、液晶診斷、同位素診斷與一般化學(xué)診斷等診斷檢查中所用的一大類化學(xué)試劑。
5、工業(yè)用化學(xué)品包括試制開發(fā)的工業(yè)用化學(xué)品,有四千種以上,還在不斷增加。
博萊霉素zeocin的使用:
1、液體Zeocin可用于細(xì)胞培養(yǎng)。
2、用于篩選轉(zhuǎn)化株的Zeocin濃度根據(jù)pH值和鹽濃度改變。
3、pH越高,鹽濃度越低Zeocin活性越大。
4、普通大腸桿菌菌株篩選可在25µg/ml zeocin濃度的低鹽LB瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行,pH調(diào)至7.5。
5、動(dòng)物細(xì)胞篩選:根據(jù)不同細(xì)胞系從100到750µg/ml。
6、植物細(xì)胞篩選:根據(jù)不同的細(xì)胞種類和培養(yǎng)基從50到250µg/ml。
7、酵母篩選:取決于種屬和培養(yǎng)基,S。cerevisiae Sh ble轉(zhuǎn)化株在50µg/ml濃度的YPD培養(yǎng)基中篩選,pH7.0.3040