溴酚蘭是一種pH指示劑,淺黃色到棕黃色粉末,易溶于氫氧化鈉溶液,溶于甲醇、乙醇和苯,微溶于水(約0.4g/100ml)。在pH3.0~4.6范圍,顏色由黃變藍(lán)。常用做電泳指示染料,凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質(zhì)區(qū)域,也常用做電泳指示染料,凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質(zhì)區(qū)域。在研究人血紅蛋白與各種動(dòng)物血紅蛋白相互作用(簡(jiǎn)稱互作)時(shí),偶然發(fā)現(xiàn),溴酚蘭(BPB)在交叉電泳過(guò)程中也能與雞血紅蛋白發(fā)生互作,但BPB與成年人血紅蛋白卻沒(méi)有此種現(xiàn)象。BPB與血紅蛋白不同,它是一種低分子化合物,其與血紅蛋白的互作,在機(jī)制上可能不同于血紅蛋白之間的相互作用。
溴酚蘭的制備
1.將苯酚紅溶于冰乙酸,攪拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液,攪拌幾分鐘后傾入60℃熱水中,冷卻至室溫,放置過(guò)夜。過(guò)濾,依次用冰乙酸、苯洗滌濾餅,晾干,得溴酚藍(lán)。
2.將酚紅溶于冰乙酸中,加熱至沸,滴加溴溶于冰乙酸中的溶液,黃色固體析出時(shí),過(guò)濾,用乙酸洗去游離溴,置于空氣中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮與冰乙酸混合溶劑重結(jié)晶,得純品溴酚藍(lán)。
3.將酚紅和溴分別溶于醋酸中,制成溶液。先將酚紅醋酸溶液加熱至沸,然后在攪拌下緩慢加入溴的醋酸溶液:當(dāng)酚紅反應(yīng)*且黃色晶體不再析出后,冷卻,過(guò)濾。用少量醋酸洗去結(jié)晶中的游離溴后,用醋酸或丙酮醋酸進(jìn)行重結(jié)晶,在空氣中干燥得純品溴酚藍(lán)。