什么是封板膜?
封板膜是一種使用了凝膠的透明封板薄膜,廣泛應(yīng)用于與96/384孔板配合的實驗中,比如:PCR、qPCR、ELISA、細胞培養(yǎng)、長期儲存、自動化工作站處理等幾乎所有的實驗都會用到。它起的主要作用是確保封板膜與96/384孔板親密貼合,以防液體蒸發(fā)。
想必經(jīng)常做這些實驗的寶寶們都遇到過翹邊、蒸發(fā)、撕不開等各種各樣的問題,本來就很難擴增的產(chǎn)物,結(jié)果蒸發(fā)了一半!心如死灰。
工欲善其事必先利其器,好不容易摸索好了實驗條件,買了好用不變性的PCR板,高透明度的封板膜了,我們還需要掌握好正確的貼膜姿勢!
正確的貼膜方法如下:
從自封袋中取出單張封板膜或封板鋁箔,然后重新封好自封袋,以保持其中的無酶環(huán)境。
? 保持底襯面朝上,握住封板膜或封板鋁箔。
? 在底襯的切線處向下折末端標簽。
? 如果使用的產(chǎn)品為單端標簽的封板膜或鋁箔,則將襯紙部分除去,然后將封板膜或鋁箔錨固到板上,使其密封在整個板上,然后繼續(xù)除去襯紙。這種方法可以消除封板膜或鋁箔產(chǎn)生的卷曲和回滾。
? 如果使用帶有兩個末端標簽的產(chǎn)品,請以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙。緩慢剝離內(nèi)襯可以大程度地減少卷曲。注意不要接觸薄膜的粘合表面。
? 用雙手抓住兩端白色部分,將膜片降低到孔板上。
? 使用壓膜板緩慢刮壓封板膜或鋁箔,使其密封到板上。此步驟應(yīng)至少水平和垂直執(zhí)行兩次。施加足夠的力對于獲得良好的密封性至關(guān)重要。(請參見下方密封方法示意圖)
? 將壓膜板沿著孔板的所有外邊緣刮壓至少兩次,確保施加堅定而持續(xù)的壓力。
? 密封后檢查平板,以確認薄膜/箔片與板之間是否緊密結(jié)合。封板膜或鋁箔不應(yīng)出現(xiàn)褶皺,如果觀察到皺紋,則說明板未正確密封。同時還要注意,封板膜或鋁箔不應(yīng)向上延伸到板的側(cè)壁上。對于邊緣凸起的平板,由于封板膜或鋁箔在板上的定位不正確,或者未撕去兩端的接頭,可能會發(fā)生這種情況。確認每個孔周圍的粘貼痕跡,平板的整個表面(包括周邊)都被密封。
? 將封板膜或鋁箔正確密封到板上之后,沿切線撕下兩端白色的接頭部分。(效果如下圖所示)
? 最好在開始PCR實驗前之前將密封的平板放置至少10分鐘,封板膜的粘合力將隨著時間增加。
? 將板轉(zhuǎn)移到PCR儀上,運行PCR儀。
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