如何做出一張合格的組織切片?
一般要先取材→固定→透明→包埋→切片,最后進(jìn)行染色組化等操作。本文著重?cái)⑹鋈〔囊院笕绾芜M(jìn)行包埋和切片。
包埋可分為OCT包埋(冰凍切片)與石蠟包埋。
冰凍切片對(duì)于組織的抗原性保留比較好,但是形態(tài)保留比較差,一般用來(lái)做原位雜交ISH,免疫熒光IF。冰凍切片較厚一般厚度8~15μm。冰凍包埋步驟較為簡(jiǎn)潔,固定之后,直接用鑷子將樣品放置到樣品托上,擠壓OCT*包裹組織,放入冷凍機(jī)待OCT凝固即可。凝固后就可以直接切片。如果不能及時(shí)切片,用錫箔紙包裝好,放入-80℃存放。
石蠟切片,一般用來(lái)做HE染色或者免疫組織化學(xué)IHC。厚度更薄,一般為4um,工藝較為復(fù)雜并且制作樣本的好壞取決于不同組織的種類和組成,更加依賴制作者的經(jīng)驗(yàn),需要在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不斷優(yōu)化才能得到最佳的實(shí)驗(yàn)條件。
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