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分享超濾離心管的使用方法

更新時(shí)間:2021-07-21 點(diǎn)擊次數(shù):530次
  超濾離心管具有快速超濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù),輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,并達(dá)到30倍的濃縮。
  超濾離心管的使用方法:
  1、將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。
  2、向超濾管內(nèi)管中加入不超過500μL的樣本,并蓋上蓋子。
  3、將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間,用一個(gè)類似的超濾管平衡。
  4、離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。
  5、為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間,用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡,超濾液可以保存在收集管中。
  注意,當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要準(zhǔn)確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時(shí)超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
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021-65672052
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