巨噬細胞去除劑可以通過誘導巨噬細胞周亡來去除組織中的巨噬細胞,目前市場上理想的用于高效巨噬細胞耗竭的試劑是氯氟松,氯氟松包被在脂質體膠囊中,具有活性高、穩(wěn)定性高及使用方便等特點。脂質體中僅含有PBS,可用于對照組實驗,以了解巨噬細胞的消耗是否歸因于注射氯氟松脂質體后產生的效果。
巨噬細胞去除劑的注射方法如下:
?。?)注射前,將Clodronate Liposomes和無菌PBS(注射用)從冰箱中取出。自然回溫到室溫(18℃)。Clodronate Liposomes懸液禁止凍存,也不能超過30℃。
?。?)上下顛倒8-10次混勻。將26Gauge針頭連接到1ml的注射器上,吸取200μl的Clodronate Liposomes。
(3)用左手抓取小鼠耳后足夠多的皮膚和尾巴,固定頭部和四肢。
(4)將小鼠微微傾斜,讓頭部朝向地面,使得原本集中在腹部右下方的器官向頭部方向移動,遠離注射位點。
(5)注射前將注射器顛倒6次,將Clodronate Liposomes混勻。長時間的放置,會使脂質體在注射器中發(fā)生沉淀,導致注射時濃度不均一。
?。?)針頭成30度角插入腹部右下方。分別注射200μlClodronate Liposomes(實驗組)和PBS(對照組)