K1622逆轉(zhuǎn)錄酶是一類存在于部分RNA病毒中具有逆轉(zhuǎn)錄活性、能以單鏈RNA為模板合成DNA的酶。由逆轉(zhuǎn)錄酶催化逆轉(zhuǎn)錄合成的DNA稱為互補(bǔ)DNA(cDNA)。 通常情況下,細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄是以DNA為模板合成RNA的,所得RNA為信使RNA(mRNA)供蛋白質(zhì)合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要實(shí)現(xiàn)自身的擴(kuò)增,必須具有DNA,因此先由RNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA再由cDNA轉(zhuǎn)錄出RNA。
K1622逆轉(zhuǎn)錄酶可用于RT-PCR,將RNA轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA后擴(kuò)增,以獲得RNA的序列。
使逆轉(zhuǎn)錄病毒成為有用的基因載體,成功地把抗藥性基因轉(zhuǎn)入了人體造血前體細(xì)胞,并在細(xì)胞中表達(dá)。Hock等選用了缺失編碼病毒外殼蛋白基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒,因此不能合成自身的外殼,但它有識(shí)別外殼蛋白進(jìn)行包裝的信號(hào),K1622逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)對于遺傳工程技術(shù)起了很大的推動(dòng)作用,它已成為一種重要的工具酶。用組織細(xì)胞提取mRNA并以它為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,合成出互補(bǔ)的cDNA,由此可構(gòu)建出cDNA文庫,從中篩選特異的目的基因,這是在基因工程技術(shù)中zui常用的獲得目的基因的方法。其目的在于避免RNA定量誤差、加樣誤差,以及各PCR反應(yīng)體系中擴(kuò)增效率不均一,各孔間的溫度差等所造成的誤差。